通用步骤
加血0清封闭液
1. 去掉片子上多余缓冲液。
2. 取适量血0清封闭液完全覆盖切片。
3. 在湿盒中室温孵育 15min。
4. 浸入洗涤缓冲液中 5min。
加一抗
1. 去掉切片上的多余洗涤缓冲液。
2. 将稀释的一抗加到切片上，完全覆盖组织细胞。
3. 在湿盒中室温孵育 30min。
4. 用洗涤缓冲液洗去一抗，在洗液中润洗 5min。
注：如果显色速度过快，建议进一步稀释一抗，将一抗稀释度以 1/50、1/100、1/200、1/400 和 1/800，protein a残留检测（试剂盒），zui佳稀释度的选择是显色 10min 后阳性显色效果满意而没有背景显色。
本试剂盒不提供的试剂
1. 一抗
2. 洗涤液
3. 过氧化物酶底物
4. 去离子水或蒸馏水
5. 内源性过氧化物酶抑制0剂
6. 封固剂
7. 其它：显微镜、玻片、盖玻片、加样器、试管、湿盒
溶液配制
1. 1×洗涤缓冲液：将 10× 洗涤缓冲液用蒸馏水进行 10 倍稀释（例如 5 ml 浓缩洗液 45
ml 蒸馏水）
2. 0.3% H2O2 无水甲0醇: 加 0.3% H2O2 无水甲0醇于组织切片上，室温孵育 30min， 在洗
涤缓冲液中润洗 10～15min。
苏0木素为碱性天然染料，可使细胞核着色。细胞核内染色质的成分主要是DNA，在DNA双螺旋结构中，两条核苷酸链上的磷酸基向外，使DNA双螺旋的外侧带负电荷，呈酸性，很容易与带正电荷的苏0木素碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。苏0木素在碱性溶液中呈蓝色，所以细胞核被染成蓝色。 用于细胞学染色和免0疫组化（IHC）复染。
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