杂交瘤分泌McAb的稳定性
杂交瘤细胞体外连续传代培养了3个月，培养上清经ELISA检测能持续分泌抗AFP—McAb，杂交细胞经液氮冻存一年后细胞复苏培养生长良好，仍能保持分泌抗AFP—McAb的能力。
杂交瘤细胞染色体计数
杂交瘤细胞染色体总数为96～104条，SP2／0骨0髓瘤细胞染色体总数为65条，Balb／c小鼠脾细胞染色体总数为40条，符合杂交瘤特征。
由于改良免0疫法只需二次基础免0疫而常规免0疫法则需要2倍于改良法的免0疫次数，所以改良法抗原用量明显少于常规法，从而大大减少了实验成本的消耗。
此外，本实验通过对比两种免0疫方法的细胞融合率及抗0体阳性率，核酸染料，发现改良免0疫法均显著高于常规免0疫法。
经过后续实验，证明改良法免0疫小鼠的杂交瘤细胞经二次克0隆化后，抗0体阳性率可达检测孔的90％以上。杂交瘤细胞体外连续传代培养，并冻存复苏后仍具有分泌AFP—McAb的能力，并经染色体计数结果表明已成功获得一株AFP—McAb细胞株。这表明改良法与常规方法具有同样的有效性和稳定性。
使用方法
1. 用生理盐水将抗原稀释到2倍zui终浓度（按每针次50μl用量配制）。
备注：推荐使用的抗原用量为
（1）免0疫原性较弱的合成肽每针次10-100μg；
（2）亚单位蛋白抗原每针次1-10μg；
（3）免0疫原性较强的灭活病原微生物和病毒样颗粒抗原每针次1-10μg；
（4）肿0瘤细胞裂解物每针次10-100μg。
2. 37oC水浴中解冻佐剂，充分混匀，无菌条件下取出所需用量（按每针次50μl）与抗原按体积比1:1混匀。
3. 通过后腿小腿肌肉或腹0股0沟皮下0注射免0疫小鼠，每只小鼠注射100μl。
4. 第7天按同样方式加强免0疫1针。备注：每次免0疫佐剂和抗原现配现用
5. 第014天通过ELISPOT、胞内细胞0因子染色、MHC四聚体染色或其他可行方法检测脾0脏或引流淋巴0结中的抗原特异性CD4 TH1和/或CD8 CTL反应。
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