作用机制:
佐剂增强免0疫应答的机制可能有:①改变抗原物理性状,延长抗原在机体内的存在时间和保持对免0疫系统的持续激0活作用,fu水制备,佐剂中的矿物油成分主要起缓释作用,有利于抗原在体内缓慢释放,延缓抗原在体内降解,从而更有效地刺激免0疫系统。②使抗原易被巨噬细胞吞噬,刺激单核巨噬细胞系统,增强其对抗原的处理和呈递抗原的能力。③促进淋巴细胞的增殖、分化,从而扩大和增强机体的免0疫应答的效应。
使用方法
1. 用生理盐水将抗原稀释到2倍zui终浓度(按每针次50μl用量配制)。
备注:推荐使用的抗原用量为
(1)免0疫原性较弱的合成肽每针次10-100μg;
(2)亚单位蛋白抗原每针次1-10μg;
(3)免0疫原性较强的灭活病原微生物和病毒样颗粒抗原每针次1-10μg;
(4)肿0瘤细胞裂解物每针次10-100μg。
2. 37oC水浴中解冻佐剂,充分混匀,无菌条件下取出所需用量(按每针次50μl)与抗原按体积比1:1混匀。
3. 通过后腿小腿肌肉或腹0股0沟皮下0注射免0疫小鼠,每只小鼠注射100μl。
4. 第7天按同样方式加强免0疫1针。备注:每次免0疫佐剂和抗原现配现用
5. 第014天通过ELISPOT、胞内细胞0因子染色、MHC四聚体染色或其他可行方法检测脾0脏或引流淋巴0结中的抗原特异性CD4 TH1和/或CD8 CTL反应。
QuickAntibody抗0体产生快,抗0体滴度高,抗0体亲合力高。以标准免0疫程序为例,无论是用于单克0隆还是多克0隆抗0体制备,只需要在三周内进行两针免0疫,通常在第五周即可获得ELISA滴
度(Cutoff值为0.1000)高达1:10000-1:10000000的高亲合力抗0体水平。
QuickAntibody不破坏抗原天然构象,从而易于筛选获得针对构象型抗原表位的单克0隆抗0体,这是弗氏佐剂所不具备的一个重要特点。
QuickAntibody是水溶性佐剂,使用时不需要弗氏佐剂的复杂乳化过程,抗原和佐剂只需简单混合即可免0疫动物。
QuickAntibody使用肌肉免0疫途径,与常规小鼠单克0隆抗0体制备过程中使用足垫或脾内免0疫相比,极大方便了使用。
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